¡Hola! Soy proveedor de biorreactores y hoy quiero compartir con ustedes cómo recolectar células de un biorreactor. Es un paso crucial en muchos bioprocesos, ya sea que esté trabajando en productos farmacéuticos, biocombustibles o simplemente haciendo alguna investigación interesante.
En primer lugar, hablemos de por qué es tan importante la recolección de células. Cuando cultivas células en un biorreactor, básicamente estás creando un pequeño ecosistema donde las células pueden prosperar y hacer lo suyo. Pero en algún momento, necesitas sacar esas células para poder usarlas para cualquiera que sea tu objetivo final. Tal vez estés extrayendo una proteína valiosa que ellos han producido, o los estés usando para hacer un nuevo lote de algo. Sea lo que sea, la recolección adecuada de células es clave para obtener buenos resultados.
Preparación previa a la cosecha
Antes de siquiera pensar en recolectar células, debes asegurarte de que todo esté configurado correctamente. Verificar las condiciones del biorreactor. Quiere conocer la densidad celular, la viabilidad y la salud general del cultivo. Puede utilizar un microscopio o algunos contadores de células automatizados sofisticados para obtener esta información. Además, asegúrese de que todo su equipo de cosecha esté limpio y listo para funcionar. Esto incluye cosas como centrífugas, filtros y recipientes colectores.
Si estás usando uno de nuestrosFotobiorreactor de vidrio para cultivo celular de tejido vegetal, está diseñado para brindarle una vista clara del cultivo celular en su interior. Puedes controlar fácilmente el crecimiento y decidir cuándo es el momento adecuado para cosechar. La construcción de vidrio también facilita la limpieza y esterilización, lo cual es muy importante para evitar la contaminación.
Métodos de cosecha
Hay algunas formas diferentes de recolectar células de un biorreactor, y el método que elija depende de algunos factores como el tipo de células que está cultivando, la escala de su operación y su uso final.
Centrifugación
La centrifugación es uno de los métodos más comunes. Funciona haciendo girar el cultivo celular a altas velocidades, lo que hace que las células se separen del medio líquido. Las células más pesadas se hunden hasta el fondo del tubo de centrífuga, formando un sedimento, mientras que el líquido más ligero (el sobrenadante) permanece en la parte superior.
Para ello, primero se transfiere el cultivo celular del biorreactor a tubos de centrífuga. Asegúrese de equilibrar correctamente los tubos en la centrífuga para evitar accidentes. Luego, establezca la velocidad y el tiempo adecuados para la centrifugación. Esto puede variar según el tipo de célula. Por ejemplo, las células de mamíferos podrían necesitar una velocidad menor en comparación con las células bacterianas.
Una vez realizada la centrifugación, retirar con cuidado el sobrenadante. Puedes usar una pipeta o simplemente verterlo suavemente. El sedimento celular en la parte inferior es lo que buscas. Luego puede resuspender las células en un nuevo tampón o medio para su posterior procesamiento.
Si trabaja a mayor escala, puede utilizar una centrífuga de flujo continuo. Son excelentes para aplicaciones industriales en las que es necesario procesar rápidamente un gran volumen de cultivo celular. NuestroBiorreactor de luz fotográfica paralelo de acero inoxidableSe puede integrar fácilmente con un sistema centrífugo de flujo continuo, lo que hace que el proceso de recolección sea más eficiente.
Filtración
La filtración es otra opción, especialmente para células sensibles a las fuerzas de corte. En este método, se pasa el cultivo celular a través de un filtro con poros lo suficientemente pequeños como para atrapar las células mientras se permite el paso del medio líquido.
Hay diferentes tipos de filtros que puedes utilizar, como filtros de membrana o filtros de profundidad. Los filtros de membrana son más precisos y pueden brindar una separación muy limpia, pero también pueden obstruirse fácilmente. Los filtros de profundidad, por otro lado, pueden manejar más desechos y son mejores para operaciones a mayor escala.
Al utilizar la filtración, debe asegurarse de que el filtro esté instalado correctamente y de no aplicar demasiada presión, lo que podría dañar las celdas. Es posible que también deba tratar previamente el cultivo celular para eliminar cualquier partícula grande que pueda obstruir el filtro.
floculación
La floculación es un método en el que se agrega un agente químico al cultivo celular para hacer que las células se agrupen. Estos grumos son entonces más fáciles de separar del medio líquido. Este método se utiliza a menudo para recolectar células microbianas.
El agente floculante puede ser un polímero o una sal. Debe controlar cuidadosamente la cantidad de agente que agrega, ya que demasiado puede tener un impacto negativo en las células. Una vez que las células hayan floculado, puede utilizar centrifugación o filtración para separar los grumos del líquido.
Manejo post-cosecha
Una vez que haya recolectado las células, deberá manipularlas con cuidado para mantener su viabilidad y funcionalidad. Si no vas a utilizar las celdas de inmediato, es posible que tengas que guardarlas. Puedes congelar las células en una solución crioprotectora a temperaturas muy bajas. Esto ayuda a prevenir la formación de cristales de hielo, que pueden dañar las células.
También debe analizar las células recolectadas para asegurarse de que cumplan con sus estándares de calidad. Esto puede implicar pruebas de viabilidad celular, contenido de proteínas u otros parámetros relevantes.
Solución de problemas
A veces, las cosas no salen según lo planeado durante la recolección de células. A continuación se muestran algunos problemas comunes y cómo solucionarlos:
- Baja recuperación celular: Esto podría deberse a una centrifugación o filtración inadecuada. Verifique la configuración de su equipo y asegúrese de que las celdas no se pierdan en el proceso. Es posible que también deba ajustar el método de recolección si las células son demasiado frágiles.
- Contaminación: Si nota signos de contaminación, como colores u olores inusuales en las células recolectadas, podría deberse a que su equipo no fue esterilizado adecuadamente. Asegúrate de limpiar y esterilizar todo tu equipo antes y después de cada uso.
- Daño celular: Las fuerzas de corte durante la centrifugación o filtración pueden dañar las células. Intente reducir la velocidad o la presión para minimizar esto. También puedes utilizar un método de recolección más suave, como la floculación.
Conclusión
La recolección de células de un biorreactor es un proceso de varios pasos que requiere una planificación y ejecución cuidadosas. Al elegir el biorreactor adecuado, como nuestroFotobiorreactor de vidrio para cultivo celular de tejido vegetal,Biorreactor de luz fotográfica paralelo de acero inoxidable, oSistema de biorreactor piloto de estado sólidoy el método de recolección adecuado, puede garantizar una recolección celular exitosa.
Si está interesado en obtener más información sobre nuestros biorreactores o tiene alguna pregunta sobre la recolección de células, no dude en comunicarse. Estamos aquí para ayudarle con todas sus necesidades de bioprocesamiento. Ya sea que se trate de un pequeño laboratorio de investigación o de una gran instalación industrial, tenemos el biorreactor adecuado para usted. Contáctenos para iniciar una conversación sobre sus requisitos específicos y trabajemos juntos para lograr sus objetivos de bioprocesamiento.
Referencias
- Smith, J. (2018). Operaciones de biorreactor: principios y prácticas. Prensa académica.
- Jones, A. (2020). Técnicas de cultivo celular. Wiley-Blackwell.
- Marrón, C. (2019). Manual de bioprocesamiento. Prensa CRC.